如何实现细胞培养的最佳环境有许多可能性。无论是封闭的系统,例如,孵化振动器还是振动器和气候室的组合,选择都是很多。
大多数细胞培养实验室通常将具有气候室作为主食清单。由于孵化器占用了很大的空间,在大多数实验室中很难找到,因此振动者的实施和现有的气候室往往很有用。
该白皮书详细介绍了培养过程中温度稳定性的重要性。为此,Heidolph Shakers对MEMMERT气候室温度被测试。
图片来源:海德尔夫北美
细胞培养的许多挑战
在整个生命科学领域中,使用微生物生产各种商品正在引起人们的关注。亚博老虎机网登录无论是用于胰岛素等药物的大规模生产还是精细化学物质的生产,都可以看到好处。
其中包括将过程中的副产品用作可再生原材料,以通过一个发酵阶段减少常规的多阶段化学过程。亚博网站下载有时,生物技术程序是生产某些产品的唯一方法。
在工业和研究领域的知名度更高,有多种使用微生物用于制造过程的方法。
由于准备和生产中有专业人士,也有缺点。例如,至关重要的是要始终确保无菌环境,总体生物量的产量可能因批量而异,以及所使用的复杂介质的组成。
这些只是微生物或整个细胞培养领域的工作过程中至关重要的几个插图。为了看不到该过程的重要性,至关重要的是要彻底计划从头到尾的过程。
为过程选择正确的参数
整个过程的主要因素之一是微生物生长。根据该过程选择了哪种微生物,必须考虑各种参数。这些可以分为化学和物理类别。
化学参数是养分培养基(宏观和微元素)和氧浓度的形成。物理参数主要考虑使用的反应堆,孵化器或气候腔周围的所有内容。
这些包括pH,温度,渗透压和由搅拌单元引起的纯粹应力。温度是整个过程的关键因素,因为它控制了细胞内的化学和酶促反应。
气候室 - 每个实验室的全能者
气候腔用于培养纯粹的应激敏感细胞,琼脂板和分析方法,例如杂交。还有各种各样的气候橱柜。
大多数型号的温度范围为 +5°C的室温,最高为100°C,并具有通过CO丰富大气的潜力2,这是细胞培养的关键因素。
如果应用要求温度低于25°C,则具有冷却连接和内部冷却系统的气候室是最佳选择。
上述技术特征也可以在孵化器中找到。因此,将振动器与气候柜结合起来时受益?由于几乎每个实验室都存在有关空间的问题,因此使用所有可用资源很明显。
尽管每天同时摇动和孵化细胞的必要性可能是多余的,但在气候柜中放置已经可用的振荡器是很简单的。
可以在一个腔室中使用各种动作的振手者。因此,执行各种应用程序的潜力会增加。
目的:测试连续摇动对气候室内媒体温度的影响
温度波动对微生物生长的影响是关键变量。海德尔夫在执行连续摇动的同时测试了Unimax 1010对温度的影响Memmert HPP260和HPP410气候室。
方法:Heidolph Unimax 1010振动筛对Memmert气候室温度波动的影响
测试系列是用两个不同尺寸的气候室进行的。根据气候室和可用空间的大小,可以安装不同数量的振动器。
Memmert HPP260配备了两个振动器,而Memmert HPP410则具有同一系列的三个振动器。实际温度测量在介质内进行。
为此,带有一升体积的埃伦叶瓶中充满了800毫升的水。RPM设置为80;实验的总时间为48h。
答:Memmert HPP260与两个Heidolph Unimax 1010结合
Heidolph Unimax 1010配备了Erlenmeyer烧瓶的附件。第二振动摇摇(也是不符号)位于气候柜中。实验组装可以在图1中说明。

图1。Memmert HPP260中的两个Heidolph Unimax 1010的实验设置。图片来源:海德尔夫北美
为了监视整个实验的温度,将传感器放置在介质内。表1显示了实验的一般条件。实验的温度时间曲线可在图2中看到。
表格1。实验中使用的参数。资料来源:海德尔夫北美
设置参数 |
摇动频率 |
温度 |
时间 |
体积(水) |
湿度控制 |
80 rpm |
37°C |
2,872分钟 |
800毫升 |
离开 |

图2。Memmert HPP260中的两个Heidolph Unimax 1010的实验设置。图片来源:海德尔夫北美
在实验开始时,培养基的温度为25.6°C,所需的实际温度为37度,在374.1分钟后达到。为了获得温度波动的精确图像,实验进行约48小时。表2概述了实验的所有结果。
表2。测试的结果在37°C的48小时内用两个Heidolph Unimax 1010进行。资料来源:海德尔夫北美
结果 |
达到设定温度的时间 |
偏离设定温度37°C |
374分钟 |
±0.3°C |
B:Memmert HPP410与三个Heidolph Unimax 1010结合使用
测试系列基于Memmert HPP260的实验。可变细节是将三个振动器放置在气候柜Memmert HPP410中。三个Heidolph Unimax 1010单元位于Memmert HPP410中。其中一只振动板装有埃伦梅尔烧瓶附件。
媒体量分别为800 mL;温度计设置为介质。保持的所需温度为37度,实验持续2,872分钟。振动器上设定了80 rpm的速度。表3演示了测试系列的所有设置参数的摘要。
表3。测试系列的参数。资料来源:海德尔夫北美
设置参数 |
摇动频率 |
温度 |
时间 |
体积(水) |
湿度控制 |
80 rpm |
37°C |
2,872分钟 |
800毫升 |
离开 |
测试系列的过程如图3所示。在实验开始时,培养基的温度为22.8°C,所需温度 - 37°C - 在372分钟后达到。

图3。在2872分钟内,在气候室Memmert HPP410中,介质的温度稳定性图三个Heidolph Unimax1010。图片来源:海德尔夫北美
实验可进行48h,以便可以直接观察到温度的任何变化。总体结果,与设定温度的偏差分别为±0.7°C。表4可以看到结果的轮廓。
表4。测试的结果使用Memmert HPP410和三个Heidolh Unimax 1010单元进行。资料来源:海德尔夫北美
结果 |
达到设定温度的时间 |
偏离设定温度37°C |
372分钟 |
±0.7°C |
C:讨论结果
Memmert HPP260测试系列期间的温度偏差分别为±0.3°C。在细胞培养的应用或孵育期间,可以很容易地适应这种偏差。
总而言之,两个Heidolph Unimax 1010单元对气候柜耐用性的影响很低。在Memmert HPP410中,温度的波动为±0.7°C。这在方差范围内,这意味着该实验设置适用于敏感应用。
结论:Memmert气候室中的Heidolph Shakers操作是细胞培养的解决方案
测试系列表明,在连续操作海德尔夫·乌玛克斯1010振手的时,没有相当大的温度偏差Memmert气候室。另外,温度敏感生物的生长不受抑制。总体而言,这是一个良好的进步工具,可以推动该过程的前进。

图片来源:海德尔夫北美

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